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颠覆传统、享受实验、让您的复杂细胞成像触手可及

2017-12-18 09:55:35 由 聆听 发表 69

EVOS FL Auto 2智能细胞成像系统的出现,颠覆了传统荧光显微镜操作复杂的现状,化繁为简的设计给使用者方便直观的体验。它采用无目镜设计,触摸屏操作,适合多通道荧光、明场和相差显微成像。

四百多年前,虎克君改进了显微镜,带人们进入了一个神秘的微观世界。二十世纪以来,荧光显微镜的开发和荧光蛋白的出现,更是让这个美妙的世界变得五彩斑斓。如今,科学家已不再满足于观察静态的细胞结构,还希望了解分子如何运动以及如何相互作用。这就催生出更精细、更复杂的荧光显微镜。


EVOS FL Auto 2智能细胞成像系统

Invitrogen™ EVOS FL Auto 2智能细胞成像系统的出现,颠覆了传统荧光显微镜操作复杂的现状,化繁为简的设计给使用者方便直观的体验。它采用无目镜设计,触摸屏操作,适合多通道荧光、明场和相差显微成像。作为新一代显微成像平台,EVOS FL Auto 2提高了扫秒速度和自动聚焦功能,可在5分钟内完成96孔板三色荧光全板扫描。采用光立方作为光源,光损耗小,寿命长,并可提供超过20种光立方覆盖几乎所有荧光染料,用户可自由更换,非常灵活。同时,该产品配备了自动化电动X/Y扫描载物台,增强拍摄精度,并且单色高清相机或彩色双相机,不仅能获得高品质荧光图像,在传统HE、IHC等组化或细胞染色成像上也表现优异。兼容载物台式培养箱,以精确控制活细胞成像过程中的环境条件,自动化活细胞长期观察。


在了解EVOS FL Auto 2的强大功能之前,我们先看几张图片感受一下。


EVOS FL Auto 2智能细胞成像系统

图1. 大鼠小肠横截面石蜡切片,H2B(紫色)和Ki67(白色),10X 成像


EVOS FL Auto 2智能细胞成像系统

图2. 大鼠子宫组织, 20X 成像


怎么样?这么一张精美的图像,无论是发表在专业的期刊,还是发表在自家朋友圈,都能赢得无数点赞吧。有了EVOS FL Auto 2,其实人人都可以做到。


高品质成像

EVOS FL Auto 2配置双相机系统。采用单色高灵敏科研级CMOS相机拍摄荧光信号,无论是细胞样品还是复杂多标记组织样品,胞内微观结构都能明察秋毫(图1)。而高分辨率彩色科研级CMOS相机动态范围广,更适合多色明场成像,分辨细微颜色差异,呈现真彩微观世界(图2)。


它还提供区域视图功能,可以任意选择成像区域,通过低倍镜(1.25-4X)快速拍摄和拼出样品轮廓区域,然后通过高倍镜对感兴趣的视野进行成像。这种智能的区域视图可以让您更快地找到关心的靶标区域。如果您需要全片扫描,更可以排除空白视野,扫描样品区域,节省拍摄时间和图片存储空间。


EVOS FL Auto 2智能细胞成像系统

尽管功能强大,但EVOS FL Auto 2在操作上却出奇简单。它采用了全自动化的设计,可以自动装换荧光通道,自动转换物镜,精确定位载物台X-Y轴自动位移、自动聚焦等功能。总之,它可以代替您完成各种复杂的操作。这样不但能节省时间,还能提高数据质量和实验重复性。


与EVOS家族的其他成员一样,EVOS FL Auto 2也采用无目镜设计,以大屏幕显示器取代传统目镜,这样您就可以直接用肉眼来观察细胞,无需暗室,眼睛不会累,操作不出错。之后再配合Celleste™图像分析软件,即使是新手,也能轻松完成复杂样本的图像分析。


正如赛默飞世尔科技高级产品经理Magnus Persmark所言,“EVOS FL Auto 2的美妙之处在于它的简约,以及它带给细胞生物学实验室的价值。它需要的培训极少,也不像传统的荧光显微镜那样复杂,这让研究人员能将更多的时间花在探索结果,而不是等待结果上。”


活细胞成像

EVOS FL Auto 2成像系统还配置全新的台式细胞培养室,适用于细胞培养条件下高分辨率的连续监控摄像。EVOS台式细胞培养室是能够精确控制温度、湿度以及气体(O2和CO2)浓度的恒温恒湿箱,可在生理和非生理条件下对活细胞进行连续动态成像。


您只需在操作软件中设置环境参数和图像采集参数,即可打造出高性能的倒置成像系统,收获精美的图像(图3)。此外,通过精确调节氧浓度,营造长期缺氧环境,并实时拍摄细胞状态,还可以研究细胞缺氧与多种疾病的关联,包括肿瘤发生、动脉硬化、炎症及非正常的血管生成。


EVOS FL Auto 2智能细胞成像系统

图3. HeLa活细胞成像,60X 成像,GFP标记线粒体,RFP标记高尔基体


长时间观察细胞事件和形态变化,当然少不了连续动态成像(time-lapse imaging)。需要丰富的成像经验,否则很难上手。EVOS FL Auto 2采用触摸屏设置,操作非常容易。只需预先设置拍摄区域和间隔时间,软件自动完成时间序列图像采集,完成拍摄后,能够以视频模式无缝创建并导出荧光或明场图像。通过这个应用,您可以观察细胞迁移、细胞分裂和创伤愈合等过程(图4)。


EVOS FL Auto 2智能细胞成像系统

图4. 小鼠胚胎细胞分裂,清晰地观察到分裂过程:原核期、2细胞期和4细胞期


图像拼接

EVOS FL Auto 2成像系统可以采集多张高放大倍数的图像,拼接在一起后实现大面积样本的高分辨率定位。合并后的图像仍保持了每组图像的光学高分辨率和最佳图像质量。这个功能适用于组织切片或干细胞集落分析,也适用于查看96孔板中的每个细胞。下面这张就是拼接后的小鼠肾脏图像(图5)。


EVOS FL Auto 2智能细胞成像系统

图5. 小鼠肾脏,10X荧光成像,9X7视野拼接图像


在创伤愈合过程中,采用图像无缝拼接扫描可以生成整个创面的图像。此外,将扫描方案保存至EVOS FL Auto 2成像系统中,您还可以返回并扫描相同的区域,从而观察整个创伤的愈合过程。通过检测分析软件,还可以计算新鲜创面的面积。


图像分析

在获取细胞图像之后,开展图像分析并获取有用数据,似乎是更大的难题。这时,强大的Celleste™图像分析软件可以派上用场。它可以提供多种智能方案,对复杂生物样本的图像进行定量分析,并自动导出数据结果。


您只需点击标出需分割的细胞或组织,Smart功能即可识别每个对象的轮廓,自动进行计数,统计各种生物学数据,如长、宽、平均荧光强度、圆度或不同组织面积百分比等。同时,您也可以根据自己的需要,设定适合的分析方案和参数,比如分析细胞活性、荧光信号随时间变化的曲线等(图6)。


  EVOS FL Auto 2智能细胞成像系统

图6. 左上:活死细胞分析;中上:组织切片定量分析;右上:共定位分析
左下:伤口愈合分析;中下:细胞骨架分析;右下:细胞自噬


通过这一个个鲜活的实例和一张张精美的图片,您是不是也体会到了EVOS FL Auto 2成像系统的不一般。如果您希望亲身体验一下这款简约而不简单的系统。


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